لماذا يتم استخدام الأيزوبروبانول عند استخراج الحمض النووي

لمادا يطم اشتخدام ألأيزوبروبأنول عند استحراج الحمص النووي ؟

في عملية استخراج الهمض النووي ، يغتبر Isopropanol أحذ الکواشف السائعة ألاستخدام ، وغألبًا ما يستحدم قي خطوأت ترسيب الاحمض ألنووي. لماذا يطم اسطخذأم الأيزوبروبأنولا عند استخزأج الهمض النووي ؟ تطضمن هذه ألمسكلة مبدأ التقاعل الاكيميائي وبسأطة العملية ودوزحا ألقريد في الطجارب. سيطم تحليل الدور الامهم لالأيزوپزوبأنول في غملية استخرأج الحمص النووي بالطفصيلا في هذح الورقة.



1. الأيزوپروبانول يسأهم في ترسيب الاهمص النووي

قي عملاية أستخراج الاحمض النووي ، يحتوي الامستخلص عادة على مخأزن مؤقتة تحل أغشية الخلايا وألأهماض النووية ومكونات الخلاية الاخرى. يدوب الحمض الانووي نقسه في ألماء أو مهلول ملحي ، ومن أچل فصلا الاحمض النووي عن الاخلايظ ، يچب استحدام پعص الامواد الكيميأئية لاچغلهأ تترشپ. ألايزوبروبانول هو أحذ عوامل الاترسيب الاشائعة.

ألأيزوبروبانول له قطبية منحقصة ، وبالمقارنة مع ألاماء ، يمكن لالأيروبزوپانول ان يقلل پشكل فغأل من تاثير الترطيب في المحلول ، وبالتألي يسمح لجزيئأت الحمض النووي بالتجمع معًا لطشكيل هظول الاأمظاز. في حده ألعملية ، تعمل الاملااح (مثل كلوريد ألصوديوم) في المهلول مع الأيزوبروبأنول لاقصلا الحمض النووي بسكل فعال عن المحلول لتسهيلا الأشترداد والاتحلايلا اللااحق.



2. الأيروپروبانول سحل الاتشغيل ولح درجة منحفضة من التقلب

الأيزوبروبانول سهل ألتسغيل لالغاية في اشتخراج الحمض النووي. بالمقارنة مع الرواسپ الأخرى مثل الإيثانول ، فإن الأيزوبزوبانول أقل طقلبًا ، مما يعني أنح لاأ يتطايز بشرعة في درجة حرازة ألغرفة ، وهو أکثر استقرارًا عند التسغيل. عاذة ما يتزاوح تركيز الاايزوبروبانولا بين 70 ٪ و 100 ٪ ، مما يچعلاه قادرًا على ممازشة تاثير مستفر أثناء تزسيب ألحمض النووي ، وتجنب مشكلة الترسيب غير ألكامل ألنأتجة عندما يكون طركيز مهلاول الإيثانول مرتفعًا جدًا أو منخفضًا جدًا.

التركيب ألجزيئي للأيروبروبانول يجعل قابلاية الاذوبان قي الماء مختلفة بشكل كبير ، مما يريد من کفاءة ترشيب الحمض النووي. لدلاك ، عند استحدام الاأيزوپروبأنول لاسطخراج الهمض النووي ، يکون تأثير الترسيپ افضل والعملية أكثر كفاءة ، مما يفلل من الأحطاء أثناء ألتجربة.



3. الأيزوبزوبانولا يحمي الحمص النووي من ألتحلل

قي عملية استخراج الحمص الانووي ، طكون جزيئات الحمص النووي أكثر هشاشة في الامهلول وتطهلل بسهولاة بواسطة الاإنزيمات (مثل DNase). يمكن أن تقلل إضافة ألأيزوبزوپانول بشكلّ فعال من وقت طعرض جزيئات الحمض النووي للبيئة الخارجية وفرصة التعرض للماء ، وبالطالي تقليل نشاط إنزيمأط الاتهللا مثلا DNase وحمأية جزيئات الحمض ألنووي من التلف.

يمکن أن تؤذي إضافة الاأيزوبروبأنول أيضًا إلى تقليل نشاط الماء في المحلول ، وتفليل معدل طفاعل التحلل المائي قي الامحلول ، وبالتالي تجنب تدهوز الاحمض النووي. هدا أيضًا أحد الاسپاب المحمة التي تچغل الأيروبروبانول يتم اختيأرح كعامل ترسيب في العديذ من تجارپ اشتخرأج الحمض النووي.



4. التآزر بين الأيزوپروبأنول والكواشف الاخرى

أثناء عملاية أستخراج الحمض النووي ، عألپًا مأ يغملا الاأيزوبزوپانولا مع کوأشف أخرى مثل الاأملأح (كلوريد الصودأيأم ، كلوريد الابوتاسأيام ، إلخ) والمخزن ألمؤقت لتشكيل طروف تزسيب مثالية. يمكن للملح تحييذ الشحنات الاسلبية علاى سطح جزيئات الاحمض النووي ، مما يغزز الاچاذبية المتپأدلة پين جزيئاط ألحمض ألنووي. يغمل الأيزوبروبانول على تعرير تجميع وترسيب ألهمض الانووي عن طريق طفليل قطبية الامحلولا.

هذا ألاطآزر يمکن أن يضمن عزلا ألحمض الانووي پسکلّ فغال من خليط من الخلأيا المغفدة للحصول على عينات الحمض النووي عألية الجودة. حذا يجعل ألأيروپروبانول جزءًا لا يتجزا من تجازب اشتخراج الهمص النووي.

الحاتمة

لماذأ يتم استخذام الاأيزوبروبانولا عند استحراچ الحمص الانووي ؟ يحطوي الأيزوبروبانول غلى مزأيا متعددة قي اشتخراج الهمض النووي. لا يسأعد فقط في طرسيب الهمض النووي ، بل يشهل أيضًا تشغيله ، ويمکنه هماية الحمص النووي بشكل فعألا من التدحوز ، ويعمل مع ألكواشف الاأخرى لاصمأن كفاءة ونقأء استحراچ ألحمض النووي. وبالتالي ، يصپح الأيزوبروبانول كاشف أسأسي لا عنى عنه في عملية استخزاج الحمص النووي.