Как изопропанол осаждает ДНК

Как изопропанол осаждает ДНК ? Подробное объяснение его принципов и приложений

Извлечение и очистка ДНК является важным шагом на территории экспериментах по молекулярной биологии . Изопропанол широко используется на территории качестве обычно используемого осадителя в процессе экстракции ДНК . Как изопропанол осаждает ДНК ? Как это помогло ученым извлечь а также очистить ДНК ? В этой статье подробно анализируются принципы этого процесса и обсуждается его применение в экстракции ДНК .



1. Основные принципы осаждения ДНК

Осаждение ДНК относится к процессу , при котором ДНК осаждается из раствора вместе с образованием твердых частиц путем изменения окружающей среды раствора на территории определенных условиях . Обычно используемые осадители включают этанол а также изопропанол . При экстракции ДНК изопропанол часто используется на территории качестве осадителя , и его действие основано на следующих принципах :

Уменьшает полярность раствора : сама молекула ДНК несет отрицательный заряд , а в водном растворе молекулы воды взаимодействуют вместе с молекулами ДНК посредством водородных связей . После добавления изопропанола он снижает полярность раствора а также ослабляет взаимодействие между молекулой ДНК и растворителем , на территории результате чего молекула ДНК больше не растворяется и образуется осадок .

Удаление воды : изопропанол взаимодействует с молекулами воды в водном растворе , уменьшая количество воды , ослабляя электростатическое отталкивание между молекулами ДНК , побуждая молекулы ДНК собираться друг вместе с другом и осаждаться .



2. Экспериментальные этапы осаждения ДНК изопропанола

Конкретные этапы того , также как изопропанол осаждает ДНК при экстракции ДНК , обычно следующие :

Лизис клеток : клетки разрушаются путем лизиса клеток или механическими методами , высвобождая ДНК .

Удаление примесей : соли , фенолы и другие методы используются для осуществления удаления белков а также других примесей на территории клетках , оставляя свободную ДНК .

Добавляют изопропанол : к раствору ДНК добавляют равный объем изопропанола а также аккуратно перемешивают . Поскольку изопропанол снижает полярность раствора , молекулы ДНК начинают осаждаться из раствора .

ДНК собирали центрифугированием : осажденные молекулы ДНК собирали в нижней части трубки путем центрифугирования для осуществления удаления надосадочной жидкости .

Промывание и растворение : осажденную ДНК промывают 70% изопропанолом , после удаления примесей очищенную ДНК в конечном итоге растворяют в соответствующем буфере или воде .

Благодаря этому процессу ДНК может быть выделена из сложных биологических образцов для получения чистых образцов ДНК .



3. Преимущества и проблемы изопропанола в осаждении ДНК

Преимущество

Высокоэффективное осаждение ДНК : изопропанол обычно может получать более полные молекулы ДНК при осаждении ДНК . По сравнению с этанолом изопропанол имеет более высокую эффективность осаждения и лучшее извлечение ДНК .

Более низкая токсичность : по сравнению с другими органическими растворителями изопропанол менее токсичен , безопасен при использовании и прост на территории обращении .

Широкий спектр применения : метод осаждения изопропанола подходит для различных биологических образцов , включая бактерии , растения , ткани животных и т . Д .

Проблемы

Хотя метод осаждения изопропанола имеет много преимуществ , существуют также некоторые проблемы :

Различия в растворимости : могут быть различия в чистоте изопропанола на территории разных партиях , поэтому в процессе осаждения ДНК это может быть затронуто , что приводит к непоследовательному извлечению ДНК .

Целостность осаждения : при неправильной манипуляции осадок ДНК может быть смешан с другими примесями , влияя на последующие экспериментальные результаты . Поэтому этап стирки является критическим .



4. Практическое применение изопропанола для осаждения ДНК

Изопропанол для осаждения ДНК широко используется , особенно в областях молекулярного клонирования , геномных исследований и судебной медицины . Общие приложения включают в себя :

Экстракция ДНК : Метод осаждения изопропанола обеспечивает простой и эффективный метод извлечения ДНК из образца клетки или ткани .

Геномный анализ : при проведении геномных исследований необходимо извлечение высококачественных образцов ДНК . Использование изопропанола для осуществления осаждения позволяет получить чистую ДНК , что обеспечивает точность последующего анализа .

Эксперименты по ПЦР и клонированию : Извлеченные образцы ДНК могут быть использованы на территории полимеразной цепной реакции (ПЦР) или экспериментах по клонированию генов . Осаждение изопропанола обеспечивает чистоту ДНК и помогает повысить успешность эксперимента .



5. Резюме

Как изопропанол осаждает ДНК ? Это в основном уменьшает полярность раствора , так что молекулы ДНК больше не растворяются , а затем осаждаются . Метод осаждения изопропанола не только эффективен и прост , но а также имеет широкий спектр применения , широко используется на территории экстракции и очистке ДНК . Несмотря на то , что во время использования существуют некоторые проблемы , благодаря правильным операционным шагам вероятность успешного извлечения ДНК может быть максимизирована , что гарантирует достоверность экспериментальных результатов .